RNAclean Kit

A-1 Sellysis of homogenisaasje net genôch

---- Ferminderje gebrûk fan gebrûk, ferheegje de hoemannichte lysisbuffer, ferheegje homogenisaasje en lystiid.

A-2 Samplebedrach is te grut

---- Ferminderje de brûkte stekproef as ferheegje de hoemannichte lysisbuffer.

A-1 Unfoldwaande sellysis as homogenisaasje

---- Ferminderje gebrûk fan gebrûk, ferheegje de hoemannichte lysisbuffer, ferheegje homogenisaasje en lystiid.

A-2 Samplebedrach is te grut

---- Ferwize asjebleaft nei de maksimum ferwurkingskapasiteit.

A-3 RNA wurdt net folslein út 'e kolom eluteare

---- Nei it tafoegjen fan RNase-frij wetter, lit it in pear minuten litte foardat it sintrifugearjen.

A-4 Ethanol yn 'e eluent

---- Nei it spoeljen, sintrifuge opnij en ferwiderje de waskbuffer safolle mooglik.

A-5 Selkultuermedium wurdt net folslein ferwidere

---- As jo ​​sellen sammelje, soargje dan asjebleaft dat jo it kultuermedium safolle mooglik ferwiderje.

A-6 De sellen opslein yn RNAstore wurde net effektyf sintrifugeare

---- RNAstore-tichtens is grutter dan it gemiddelde selkultuermedium; sadat de sintrifugale krêft moat wurde ferhege. It wurdt oanrikkemandearre om te centrifuge by 3000x g.

A-7 Lege RNA-ynhâld en oerfloed yn 'e stekproef

---- Brûk in posityf stekproef om te bepalen as de lege opbringst wurdt feroarsake troch de stekproef.

A-1 It materiaal is net fris

---- Frisse weefsels moatte wurde opslein yn floeibere stikstof direkt as fuortendaliks yn 'e RNAstore-reagens set om it ekstraksje-effekt te garandearjen.

A-2 Samplebedrach is te grut

---- Ferminderje samplebedrach.

A-3 RNase fersmoargingn

---- Hoewol de buffer foarsjoen yn 'e kit gjin RNase befettet, is it maklik om RNase te kontaminearjen tidens ekstraksjeproses en moat mei soarch wurde behannele.

A-4 Elektroforese fersmoarging

---- Ferfange de elektroforesebuffer en soargje derfoar dat de verbruiksartikelen en de ladenbuffer frij binne fan RNase-besmetting.

A-5 Te folle laden foar elektroforese

---- Ferminderje de hoemannichte monsterladen, it laden fan elke put moat 2 μg net mear wêze.

A-1 Samplebedrach is te grut

---- Ferminderje samplebedrach.

A-2 Guon samples hawwe hege DNA-ynhâld en kinne wurde behannele mei DNase.

---- RNase-Free DNase-behanneling útfiere nei de krigen RNA-oplossing, en de RNA kin direkt wurde brûkt foar folgjende eksperiminten nei behanneling, of kin wurde fierder suvere troch RNA-suveringskits.

Foar glêswaren, bakt op 150 ° C foar 4 oeren. Foar plestik konteners, ûnderdompele yn 0,5 M NaOH foar 10 min, dan deeglik spoel mei RNase-frij wetter en dan sterilisearje om RNase folslein te ferwiderjen. De reagents as oplossingen brûkt yn it eksperimint, foaral wetter, moatte frij wêze fan RNase. Brûk RNase-frij wetter foar alle reagenspreparaten (foegje wetter ta oan in skjinne glêzen flesse, foegje DEPC ta oan in definitive konsintraasje fan 0,1% (V/V), skodzje nachts en autoklaaf).